产品名称：犬谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-Px) ELISA试剂盒
英文名称：Canine Glutathione Peroxidase (GSH-Px) ELISA Kit
品牌：卡凯希
产品特性
- 检测原理：采用双抗体一步夹心法ELISA技术。
- 样本类型：适用于犬类的血清、血浆等样本。
- 规格：48T/96T
- 贮藏：2-8℃,避光防潮保存。
- 有效期：6个月。
- 特点：高灵敏度、特异性强、重复性好。
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准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
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灵敏度:检测浓度小于1.0 μg/mL。
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重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
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特：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
注意事项
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该试剂盒仅供科学研究使用，不得用于临床诊断。
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在使用前需仔细阅读说明书，确保正确操作。
犬谷胱甘肽化物酶GSH-PxELISA试剂盒
样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1.酶标仪（450nm）
2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成
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名称
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96孔配置
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48孔配置
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备注
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微孔酶标板
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12孔×8条
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12孔×4条
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无
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标准品
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0.3mL*6管
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0.3mL*6管
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无
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样本稀释液
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6mL
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3mL
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无
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检测抗体-HRP
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10mL
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5mL
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无
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20×洗涤缓冲液
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25mL
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15mL
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按说明书进行稀释
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底物A
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6mL
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3mL
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无
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底物B
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6mL
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3mL
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无
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终止液
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6mL
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3mL
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无
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封板膜
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2张
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2张
|
无
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说明书
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1份
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1份
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无
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自封袋
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1个
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1个
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无
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试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
1. 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
2. 自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
操作步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去5.洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
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